คำตอบและคำถามที่เกี่ยวข้องกับห้องปลอดเชื้อ

การแนะนำ

ในทางการแพทย์ ห้องคลีนรูมหมายถึงห้องที่ได้มาตรฐาน GMP (มาตรฐานการผลิตที่ดี) เนื่องจากข้อกำหนดที่เข้มงวดของการพัฒนาเทคโนโลยีการผลิตที่ส่งผลต่อสภาพแวดล้อมการผลิต ห้องคลีนรูมในห้องปฏิบัติการจึงได้รับการยกย่องว่าเป็น "ผู้พิทักษ์การผลิตระดับสูง"

1. ห้องปลอดเชื้อคืออะไร

ห้องปลอดฝุ่น หรือที่เรียกว่าห้องคลีนรูม มักใช้เป็นส่วนหนึ่งของการผลิตทางอุตสาหกรรมระดับมืออาชีพหรือการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ รวมถึงการผลิตยา วงจรรวม จอแสดงผล CRT, LCD, OLED และไมโคร LED เป็นต้น

ห้องปลอดเชื้อได้รับการออกแบบมาเพื่อรักษาระดับอนุภาคให้ต่ำมาก เช่น ฝุ่นละออง จุลินทรีย์ในอากาศ หรืออนุภาคที่ระเหยเป็นไอ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง ห้องปลอดเชื้อจะมีระดับการปนเปื้อนที่ควบคุมได้ ซึ่งระบุโดยจำนวนอนุภาคต่อลูกบาศก์เมตรที่ขนาดอนุภาคที่กำหนด

ห้องปลอดเชื้อยังหมายถึงพื้นที่กักกันใดๆ ที่มีการกำหนดมาตรการเพื่อลดการปนเปื้อนของอนุภาคและควบคุมพารามิเตอร์ด้านสิ่งแวดล้อมอื่นๆ เช่น อุณหภูมิ ความชื้น และความดัน ในแง่ของเภสัชกรรม ห้องปลอดเชื้อคือห้องที่ตรงตามข้อกำหนดของมาตรฐาน GMP ที่กำหนดไว้ในข้อกำหนดปลอดเชื้อของ GMP เป็นการผสมผสานระหว่างการออกแบบทางวิศวกรรม การผลิต การตกแต่ง และการควบคุมการดำเนินงาน (กลยุทธ์การควบคุม) ที่จำเป็นในการเปลี่ยนห้องธรรมดาให้เป็นห้องปลอดเชื้อ ห้องปลอดเชื้อถูกนำไปใช้ในอุตสาหกรรมต่างๆ มากมาย ที่ซึ่งอนุภาคขนาดเล็กอาจส่งผลเสียต่อกระบวนการผลิต

ห้องปลอดเชื้อมีขนาดและความซับซ้อนแตกต่างกันไป และมีการใช้งานอย่างแพร่หลายในอุตสาหกรรมต่างๆ เช่น การผลิตเซมิคอนดักเตอร์ ยา เทคโนโลยีชีวภาพ อุปกรณ์ทางการแพทย์ และวิทยาศาสตร์ชีวภาพ รวมถึงกระบวนการผลิตที่สำคัญซึ่งพบได้ทั่วไปในอุตสาหกรรมการบินและอวกาศ ทัศนศาสตร์ การทหาร และกระทรวงพลังงาน

2. การพัฒนาห้องปลอดเชื้อ

ห้องปลอดเชื้อสมัยใหม่ถูกคิดค้นโดยนักฟิสิกส์ชาวอเมริกัน วิลลิส วิทฟิลด์ วิทฟิลด์ซึ่งทำงานอยู่ที่ห้องปฏิบัติการแห่งชาติแซนเดีย ได้ออกแบบห้องปลอดเชื้อรุ่นแรกในปี 1966 ก่อนการคิดค้นของวิทฟิลด์ ห้องปลอดเชื้อในยุคแรกมักประสบปัญหาเกี่ยวกับอนุภาคและกระแสลมที่ไม่สามารถคาดเดาได้

วิทฟิลด์ออกแบบห้องปลอดเชื้อโดยใช้ระบบการไหลเวียนของอากาศที่คงที่และกรองอย่างเข้มงวดเพื่อรักษาความสะอาดของพื้นที่ โรงงานผลิตวงจรรวมส่วนใหญ่ในซิลิคอนแวลลีย์สร้างขึ้นโดยบริษัทสามแห่ง ได้แก่ MicroAire, PureAire และ Key Plastics พวกเขาผลิตหน่วยการไหลแบบลามินาร์ กล่องถุงมือ ห้องปลอดเชื้อ และห้องอาบอากาศ รวมถึงถังสารเคมีและโต๊ะทำงานสำหรับการสร้างวงจรรวมแบบ "กระบวนการเปียก" บริษัททั้งสามยังเป็นผู้บุกเบิกในการใช้เทฟลอนสำหรับปืนลม ปั๊มสารเคมี เครื่องขัด ปืนฉีดน้ำ และอุปกรณ์อื่นๆ ที่จำเป็นสำหรับการผลิตวงจรรวม วิลเลียม (บิล) ซี. แมคเอลรอย จูเนียร์ ดำรงตำแหน่งผู้จัดการฝ่ายวิศวกรรม หัวหน้างานห้องเขียนแบบ ฝ่ายประกันคุณภาพ/ควบคุมคุณภาพ และนักออกแบบให้กับบริษัททั้งสามแห่ง และการออกแบบของเขาได้เพิ่มสิทธิบัตรดั้งเดิม 45 ฉบับให้กับเทคโนโลยีในยุคนั้น

3. หลักการของระบบการไหลเวียนอากาศในห้องปลอดเชื้อ

ห้องปลอดเชื้อควบคุมอนุภาคในอากาศโดยใช้ตัวกรอง HEPA หรือ ULPA โดยใช้หลักการไหลของอากาศแบบลามินาร์ (การไหลทางเดียว) หรือแบบเทอร์บิวเลนต์ (การไหลแบบปั่นป่วน ไม่ใช่การไหลทางเดียว)

ระบบการไหลเวียนอากาศแบบลามินาร์หรือแบบทางเดียว จะส่งอากาศที่ผ่านการกรองแล้วในทิศทางคงที่ลงด้านล่างหรือในแนวนอนไปยังตัวกรองที่ติดตั้งอยู่บนผนังใกล้กับพื้นห้องคลีนรูม หรือหมุนเวียนผ่านแผงพื้นที่มีรูพรุนยกสูง

ระบบการไหลเวียนของอากาศแบบลามินาร์มักใช้กับพื้นที่เพดานห้องคลีนรูมมากกว่า 80% เพื่อรักษาระดับการไหลเวียนของอากาศให้คงที่ วัสดุสแตนเลสหรือวัสดุอื่นๆ ที่ไม่หลุดร่วงง่ายถูกนำมาใช้ในการสร้างตัวกรองและฮูดแบบการไหลเวียนของอากาศแบบลามินาร์ เพื่อป้องกันไม่ให้อนุภาคส่วนเกินเข้าสู่ในอากาศ การไหลเวียนของอากาศแบบปั่นป่วน หรือแบบไม่เป็นทิศทางเดียว จะใช้ฮูดแบบการไหลเวียนของอากาศแบบลามินาร์และตัวกรองความเร็วที่ไม่จำเพาะเจาะจง เพื่อรักษาการไหลเวียนของอากาศในห้องคลีนรูมให้คงที่ แม้ว่าจะไม่ใช่ในทิศทางเดียวกันทั้งหมดก็ตาม

ระบบลมร้อนพยายามดักจับอนุภาคที่อาจอยู่ในอากาศและผลักลงสู่พื้น ซึ่งอนุภาคเหล่านั้นจะเข้าสู่ตัวกรองและออกจากสภาพแวดล้อมห้องปลอดเชื้อ บางแห่งอาจเพิ่มห้องปลอดเชื้อแบบเวกเตอร์: อากาศจะถูกส่งเข้าไปที่มุมด้านบนของห้อง ใช้ตัวกรอง HEPA รูปทรงพัดลม หรืออาจใช้ตัวกรอง HEPA ทั่วไปร่วมกับช่องจ่ายอากาศรูปทรงพัดลมก็ได้ ช่องระบายอากาศกลับจะอยู่ที่ส่วนล่างของอีกด้านหนึ่ง อัตราส่วนความสูงต่อความยาวของห้องโดยทั่วไปจะอยู่ระหว่าง 0.5 ถึง 1 ห้องปลอดเชื้อประเภทนี้สามารถบรรลุระดับความสะอาด Class 5 (Class 100) ได้เช่นกัน

ห้องปลอดเชื้อต้องการอากาศปริมาณมากและโดยปกติจะมีการควบคุมอุณหภูมิและความชื้น เพื่อลดต้นทุนในการเปลี่ยนแปลงอุณหภูมิหรือความชื้นโดยรอบ ประมาณ 80% ของอากาศจะถูกนำกลับมาหมุนเวียน (หากคุณลักษณะของผลิตภัณฑ์เอื้ออำนวย) และอากาศที่หมุนเวียนกลับมานั้นจะถูกกรองก่อนเพื่อกำจัดสิ่งปนเปื้อนที่เป็นอนุภาคในขณะที่รักษาอุณหภูมิและความชื้นที่เหมาะสมก่อนที่จะผ่านเข้าไปในห้องปลอดเชื้อ

อนุภาคในอากาศ (สารปนเปื้อน) อาจลอยไปมา หรือส่วนใหญ่จะค่อยๆ ตกลงมา โดยอัตราการตกลงมาขึ้นอยู่กับขนาดของอนุภาค ระบบระบายอากาศที่ดีควรส่งอากาศบริสุทธิ์ที่กรองแล้วทั้งจากห้องสะอาดไปยังห้องปลอดเชื้อพร้อมกัน และพัดพาอนุภาคออกจากห้องปลอดเชื้อไปพร้อมกัน โดยปกติแล้ว อากาศที่นำออกจากห้องจะถูกนำกลับมาหมุนเวียนผ่านระบบระบายอากาศ ซึ่งตัวกรองจะช่วยกำจัดอนุภาคต่างๆ ออกไป

หากกระบวนการผลิต วัตถุดิบ หรือผลิตภัณฑ์มีปริมาณความชื้น ไอระเหย หรือก๊าซที่เป็นอันตรายมาก อากาศนี้จะไม่สามารถนำกลับมาหมุนเวียนในห้องได้ โดยปกติแล้วอากาศนี้จะถูกระบายออกสู่บรรยากาศภายนอก จากนั้นจึงดูดอากาศบริสุทธิ์ 100% เข้าสู่ระบบห้องปลอดเชื้อและทำการบำบัดก่อนเข้าสู่ห้องปลอดเชื้อ

ปริมาณอากาศที่เข้าสู่ห้องปลอดเชื้อนั้นถูกควบคุมอย่างเข้มงวด และปริมาณอากาศที่ระบายออกก็ถูกควบคุมอย่างเข้มงวดเช่นกัน ห้องปลอดเชื้อส่วนใหญ่จะมีความดันอากาศสูง ซึ่งทำได้โดยการเพิ่มปริมาณอากาศที่เข้าสู่ห้องปลอดเชื้อมากกว่าปริมาณอากาศที่ระบายออก ความดันที่สูงเกินไปอาจทำให้เกิดการรั่วไหลของอากาศจากใต้ประตูหรือผ่านรอยแตกหรือช่องว่างเล็กๆ ที่หลีกเลี่ยงไม่ได้ในห้องปลอดเชื้อทุกแห่ง หัวใจสำคัญของการออกแบบห้องปลอดเชื้อที่ดีคือการกำหนดตำแหน่งที่เหมาะสมของช่องรับอากาศ (ช่องจ่ายอากาศ) และช่องระบายอากาศ (ช่องระบายอากาศ)

ในการออกแบบห้องปลอดเชื้อ ตำแหน่งของช่องรับอากาศและช่องระบายอากาศ (ช่องลมกลับ) ควรเป็นสิ่งสำคัญอันดับแรก ช่องรับอากาศ (บนเพดาน) และช่องลมกลับ (ในระดับที่ต่ำกว่า) ควรอยู่คนละด้านของห้องปลอดเชื้อ หากผู้ปฏิบัติงานจำเป็นต้องได้รับการปกป้องจากผลิตภัณฑ์ ทิศทางการไหลของอากาศควรอยู่ห่างจากผู้ปฏิบัติงาน องค์การอาหารและยาของสหรัฐอเมริกา (US FDA) และสหภาพยุโรป (EU) มีแนวทางและข้อจำกัดที่เข้มงวดมากเกี่ยวกับการปนเปื้อนของจุลินทรีย์ และสามารถใช้ช่องว่างระหว่างเครื่องปรับอากาศและชุดกรองอากาศ รวมถึงแผ่นกันความชื้นได้ สำหรับห้องปลอดเชื้อที่ต้องการอากาศระดับ A การไหลของอากาศจะเป็นจากบนลงล่างและเป็นทิศทางเดียวหรือแบบลามินาร์ เพื่อให้แน่ใจว่าอากาศจะไม่ปนเปื้อนก่อนที่จะสัมผัสกับผลิตภัณฑ์

4. การปนเปื้อนของห้องปลอดเชื้อ

ภัยคุกคามที่ใหญ่ที่สุดต่อการปนเปื้อนในห้องปลอดเชื้อมาจากตัวผู้ใช้เอง ในอุตสาหกรรมการแพทย์และเภสัชกรรม การควบคุมจุลินทรีย์มีความสำคัญมาก โดยเฉพาะอย่างยิ่งจุลินทรีย์ที่อาจหลุดออกมาจากผิวหนังและสะสมอยู่ในอากาศ การศึกษาจุลินทรีย์ในห้องปลอดเชื้อมีความสำคัญอย่างยิ่งสำหรับนักจุลชีววิทยาและเจ้าหน้าที่ควบคุมคุณภาพในการประเมินแนวโน้มการเปลี่ยนแปลง โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการคัดกรองสายพันธุ์ที่ดื้อยาและการวิจัยวิธีการทำความสะอาดและฆ่าเชื้อ จุลินทรีย์ในห้องปลอดเชื้อโดยทั่วไปส่วนใหญ่เกี่ยวข้องกับผิวหนังของมนุษย์ และจะมีจุลินทรีย์จากแหล่งอื่น ๆ เช่น จากสิ่งแวดล้อมและน้ำ แต่ในปริมาณที่น้อยกว่า สกุลแบคทีเรียทั่วไป ได้แก่ Micrococcus, Staphylococcus, Corynebacterium และ Bacillus และสกุลเชื้อรา ได้แก่ Aspergillus และ Penicillium

การรักษาความสะอาดของห้องปลอดเชื้อนั้นต้องอาศัยองค์ประกอบหลักสามประการ

(1) พื้นผิวภายในของห้องปลอดเชื้อและอุปกรณ์ภายใน

หลักการคือ การเลือกวัสดุมีความสำคัญ และการทำความสะอาดและฆ่าเชื้อโรคเป็นประจำทุกวันมีความสำคัญยิ่งกว่า เพื่อให้เป็นไปตามมาตรฐาน GMP และบรรลุข้อกำหนดด้านความสะอาด พื้นผิวทั้งหมดในห้องปลอดเชื้อควรเรียบและปิดสนิท ไม่ก่อให้เกิดมลพิษเอง กล่าวคือ ไม่มีฝุ่นหรือเศษสิ่งสกปรก ทนต่อการกัดกร่อน ทำความสะอาดง่าย มิเช่นนั้นจะเป็นแหล่งเพาะพันธุ์ของจุลินทรีย์ และพื้นผิวควรแข็งแรงทนทาน ไม่แตกหักหรือบุบง่าย มีวัสดุให้เลือกมากมาย รวมถึงแผ่นไม้อัดราคาแพง กระจก ฯลฯ ตัวเลือกที่ดีที่สุดและสวยงามที่สุดคือกระจก ควรดำเนินการทำความสะอาดและฆ่าเชื้อโรคอย่างสม่ำเสมอตามข้อกำหนดของห้องปลอดเชื้อในทุกระดับ ความถี่ในการทำความสะอาดอาจเป็นหลังการผ่าตัดแต่ละครั้ง หลายครั้งต่อวัน ทุกวัน ทุกสองสามวัน สัปดาห์ละครั้ง เป็นต้น แนะนำให้ทำความสะอาดและฆ่าเชื้อโต๊ะผ่าตัดหลังการผ่าตัดแต่ละครั้ง ฆ่าเชื้อพื้นทุกวัน ฆ่าเชื้อผนังทุกสัปดาห์ และทำความสะอาดและฆ่าเชื้อพื้นที่ทุกเดือนตามระดับความสะอาดของห้องและมาตรฐานและข้อกำหนดที่กำหนดไว้ และควรเก็บรักษาบันทึกไว้ด้วย

(2) การควบคุมอากาศในห้องปลอดเชื้อ

โดยทั่วไป จำเป็นต้องเลือกการออกแบบห้องปลอดเชื้อที่เหมาะสม ดำเนินการบำรุงรักษาอย่างสม่ำเสมอ และตรวจสอบทุกวัน ควรให้ความสำคัญเป็นพิเศษกับการตรวจสอบแบคทีเรียลอยตัวในห้องปลอดเชื้อสำหรับอุตสาหกรรมยา โดยใช้เครื่องเก็บตัวอย่างแบคทีเรียลอยตัวเพื่อดูดอากาศปริมาณหนึ่งจากห้อง อากาศที่ดูดเข้าไปจะไหลผ่านจานสัมผัสที่บรรจุอาหารเลี้ยงเชื้อเฉพาะ จานสัมผัสจะดักจับจุลินทรีย์ จากนั้นจะนำจานไปวางในตู้อบเพื่อนับจำนวนโคโลนีและคำนวณจำนวนจุลินทรีย์ในห้อง นอกจากนี้ยังจำเป็นต้องตรวจจับจุลินทรีย์ในชั้นลามินาร์ โดยใช้เครื่องเก็บตัวอย่างแบคทีเรียลอยตัวในชั้นลามินาร์ หลักการทำงานคล้ายกับการเก็บตัวอย่างในพื้นที่ ยกเว้นว่าจุดเก็บตัวอย่างต้องอยู่ในชั้นลามินาร์ หากจำเป็นต้องใช้ลมอัดในห้องปลอดเชื้อ ก็จำเป็นต้องทำการทดสอบจุลินทรีย์ในลมอัดด้วย โดยใช้เครื่องตรวจจับลมอัดที่เหมาะสม ต้องปรับความดันลมอัดให้อยู่ในช่วงที่เหมาะสมเพื่อป้องกันการทำลายจุลินทรีย์และอาหารเลี้ยงเชื้อ

(3) ข้อกำหนดสำหรับบุคลากรในห้องปลอดเชื้อ

บุคลากรที่ทำงานในห้องปลอดเชื้อต้องได้รับการฝึกอบรมอย่างสม่ำเสมอเกี่ยวกับทฤษฎีการควบคุมการปนเปื้อน พวกเขาเข้าและออกจากห้องปลอดเชื้อผ่านทางประตูอากาศ ห้องอาบอากาศ และ/หรือห้องเปลี่ยนเสื้อผ้า และต้องสวมใส่เสื้อผ้าที่ออกแบบมาเป็นพิเศษเพื่อปกปิดผิวหนังและสารปนเปื้อนที่เกิดขึ้นตามธรรมชาติบนร่างกาย ทั้งนี้ ขึ้นอยู่กับการจำแนกประเภทหรือหน้าที่ของห้องปลอดเชื้อ เสื้อผ้าของเจ้าหน้าที่อาจต้องการเพียงการป้องกันอย่างง่าย เช่น เสื้อคลุมและหมวกคลุมศีรษะ หรืออาจเป็นเสื้อผ้าที่ปกปิดมิดชิดและไม่เปิดเผยผิวหนังเลย เสื้อผ้าสำหรับห้องปลอดเชื้อใช้เพื่อป้องกันไม่ให้อนุภาคและ/หรือจุลินทรีย์ถูกปล่อยออกมาจากร่างกายของผู้สวมใส่และปนเปื้อนสิ่งแวดล้อม

ชุดสำหรับห้องปลอดเชื้อต้องไม่ปล่อยอนุภาคหรือเส้นใยเพื่อป้องกันการปนเปื้อนของสิ่งแวดล้อม การปนเปื้อนของบุคลากรประเภทนี้สามารถลดประสิทธิภาพของผลิตภัณฑ์ในอุตสาหกรรมเซมิคอนดักเตอร์และเภสัชกรรม และอาจนำไปสู่การติดเชื้อข้ามสายพันธุ์ระหว่างบุคลากรทางการแพทย์และผู้ป่วยในอุตสาหกรรมการดูแลสุขภาพได้ อุปกรณ์ป้องกันในห้องปลอดเชื้อประกอบด้วยชุดป้องกัน รองเท้าบูท รองเท้า ผ้ากันเปื้อน ที่คลุมเครา หมวกทรงกลม หน้ากาก ชุดทำงาน/เสื้อคลุมห้องปฏิบัติการ เสื้อคลุมยาว ถุงมือและปลอกนิ้ว ปลอกแขน และที่คลุมรองเท้าและรองเท้าบูท ประเภทของชุดในห้องปลอดเชื้อที่ใช้ควรสอดคล้องกับห้องปลอดเชื้อและประเภทของผลิตภัณฑ์ ห้องปลอดเชื้อระดับต่ำอาจต้องใช้รองเท้าพิเศษที่มีพื้นรองเท้าเรียบสนิทซึ่งจะไม่เกาะติดฝุ่นหรือสิ่งสกปรก อย่างไรก็ตาม ด้วยเหตุผลด้านความปลอดภัย พื้นรองเท้าต้องไม่ทำให้เกิดอันตรายจากการลื่นไถล โดยปกติแล้วจำเป็นต้องสวมชุดในห้องปลอดเชื้อก่อนเข้าห้องปลอดเชื้อ เสื้อคลุมห้องปฏิบัติการแบบธรรมดา ที่คลุมศีรษะ และที่คลุมรองเท้าสามารถใช้ได้สำหรับห้องปลอดเชื้อระดับ 10,000 สำหรับห้องปลอดเชื้อระดับ 100 จำเป็นต้องใช้ชุดห่อหุ้มร่างกายแบบเต็มตัว ชุดป้องกันแบบมีซิป แว่นตา หน้ากาก ถุงมือ และที่คลุมรองเท้าบูท นอกจากนี้ ควรควบคุมจำนวนคนในห้องปลอดเชื้อ โดยเฉลี่ยอยู่ที่ 4 ถึง 6 ตารางเมตรต่อคน และควรดำเนินการอย่างนุ่มนวล หลีกเลี่ยงการเคลื่อนไหวที่ใหญ่และรวดเร็ว

5. วิธีการฆ่าเชื้อที่ใช้กันทั่วไปในห้องปลอดเชื้อ

(1) การฆ่าเชื้อด้วยรังสียูวี

(2) การฆ่าเชื้อด้วยโอโซน

(3) การฆ่าเชื้อด้วยก๊าซ สารฆ่าเชื้อได้แก่ ฟอร์มาลดีไฮด์ อีพอกซีอีเทน กรดเปอร์ออกซีอะซิติก กรดคาร์โบลิก และส่วนผสมของกรดแลคติก เป็นต้น

(4) สารฆ่าเชื้อ

สารฆ่าเชื้อที่ใช้กันทั่วไป ได้แก่ ไอโซโพรพิลแอลกอฮอล์ (75%), เอทานอล (75%), กลูตารัลดีไฮด์, คลอร์เฮกซิดีน เป็นต้น วิธีการฆ่าเชื้อในห้องปลอดเชื้อแบบดั้งเดิมในโรงงานผลิตยาของจีนคือการรมควันด้วยฟอร์มาลดีไฮด์ โรงงานผลิตยาในต่างประเทศเชื่อว่าฟอร์มาลดีไฮด์มีอันตรายต่อร่างกายมนุษย์ ปัจจุบันจึงนิยมใช้การพ่นกลูตารัลดีไฮด์แทน สารฆ่าเชื้อที่ใช้ในห้องปลอดเชื้อจะต้องผ่านการฆ่าเชื้อและกรองผ่านเยื่อกรองขนาด 0.22 ไมโครเมตรในตู้ชีวความปลอดภัย

6. การจำแนกประเภทของห้องปลอดเชื้อ

ห้องปลอดเชื้อถูกจำแนกตามจำนวนและขนาดของอนุภาคที่อนุญาตต่อปริมาตรอากาศ ตัวเลขขนาดใหญ่ เช่น "Class 100" หรือ "Class 1000" หมายถึงมาตรฐาน FED-STD-209E ซึ่งระบุจำนวนอนุภาคขนาด 0.5 ไมโครเมตรขึ้นไปที่อนุญาตต่อลูกบาศก์ฟุตของอากาศ มาตรฐานนี้ยังอนุญาตให้มีการประมาณค่าระหว่างจุดได้ ตัวอย่างเช่น SNOLAB ถูกบำรุงรักษาสำหรับห้องปลอดเชื้อ Class 2000 เครื่องนับอนุภาคในอากาศแบบกระจายแสงจะถูกใช้เพื่อกำหนดความเข้มข้นของอนุภาคในอากาศที่มีขนาดเท่ากับหรือใหญ่กว่าขนาดที่กำหนด ณ ตำแหน่งการสุ่มตัวอย่างที่กำหนด

ค่าทศนิยมอ้างอิงถึงมาตรฐาน ISO 14644-1 ซึ่งระบุค่าลอการิทึมฐานสิบของจำนวนอนุภาคขนาด 0.1 ไมโครเมตรขึ้นไปที่อนุญาตต่อลูกบาศก์เมตรของอากาศ ตัวอย่างเช่น ห้องปลอดเชื้อ ISO Class 5 จะมีอนุภาคสูงสุด 10⁵ อนุภาค/ลูกบาศก์เมตร ทั้งมาตรฐาน FS 209E และ ISO 14644-1 ถือว่ามีความสัมพันธ์แบบลอการิทึมระหว่างขนาดอนุภาคและความเข้มข้นของอนุภาค ดังนั้น ความเข้มข้นของอนุภาคเป็นศูนย์จึงไม่มีอยู่จริง บางคลาสไม่จำเป็นต้องทดสอบอนุภาคบางขนาดเนื่องจากความเข้มข้นต่ำหรือสูงเกินไปจนไม่สามารถทำได้จริง แต่ค่าว่างดังกล่าวไม่ควรถูกพิจารณาว่าเป็นศูนย์ เนื่องจาก 1 ลูกบาศก์เมตรมีค่าประมาณ 35 ลูกบาศก์ฟุต มาตรฐานทั้งสองจึงเทียบเท่ากันโดยประมาณเมื่อวัดอนุภาคขนาด 0.5 ไมโครเมตร อากาศภายในอาคารทั่วไปมีค่าประมาณ Class 1,000,000 หรือ ISO 9

ISO 14644-1 และ ISO 14698 เป็นมาตรฐานที่ไม่ใช่ของรัฐบาล ซึ่งพัฒนาโดยองค์การมาตรฐานสากล (ISO) โดยมาตรฐาน ISO 14644-1 ใช้กับห้องปลอดเชื้อโดยทั่วไป ส่วนมาตรฐาน ISO 14698 ใช้กับห้องปลอดเชื้อในกรณีที่อาจมีปัญหาการปนเปื้อนทางชีวภาพ

หน่วยงานกำกับดูแลในปัจจุบัน ได้แก่ ISO, USP 800, มาตรฐานของรัฐบาลกลางสหรัฐฯ 209E (มาตรฐานเดิม แต่ยังคงใช้อยู่) พระราชบัญญัติคุณภาพและความปลอดภัยของยา (DQSA) ก่อตั้งขึ้นในเดือนพฤศจิกายน 2013 เพื่อแก้ไขปัญหาการเสียชีวิตและการเกิดผลข้างเคียงร้ายแรงจากการผสมยา พระราชบัญญัติอาหาร ยา และเครื่องสำอางของรัฐบาลกลาง (FD&C Act) กำหนดแนวทางและนโยบายเฉพาะสำหรับสูตรยาสำหรับมนุษย์ 503A อยู่ภายใต้การกำกับดูแลของบุคลากรที่ได้รับอนุญาต (เภสัชกร/แพทย์) โดยหน่วยงานที่ได้รับอนุญาตจากรัฐหรือรัฐบาลกลาง 503B เกี่ยวข้องกับสถานประกอบการที่รับจ้างผลิตยา และต้องอยู่ภายใต้การกำกับดูแลโดยตรงของเภสัชกรที่ได้รับใบอนุญาต และไม่จำเป็นต้องเป็นร้านขายยาที่ได้รับใบอนุญาต สถานประกอบการเหล่านี้ได้รับใบอนุญาตจากสำนักงานคณะกรรมการอาหารและยา (FDA)

แนวทางปฏิบัติ GMP ของสหภาพยุโรปเข้มงวดกว่าแนวทางปฏิบัติอื่นๆ และกำหนดให้ห้องปลอดเชื้อต้องสามารถนับจำนวนอนุภาคได้ทั้งในขณะใช้งาน (ระหว่างการผลิต) และในขณะหยุดทำงาน (เมื่อไม่มีการผลิตเกิดขึ้น แต่เครื่องปรับอากาศในห้องเปิดอยู่)

8. คำถามจากผู้ใช้ห้องปฏิบัติการมือใหม่

(1) คุณเข้าและออกจากห้องปลอดเชื้อได้อย่างไร? คนและสินค้าเข้าและออกผ่านทางเข้าและทางออกที่แตกต่างกัน คนเข้าและออกผ่านทางล็อกอากาศ (บางแห่งมีห้องอาบน้ำอากาศ) หรือไม่มีล็อกอากาศและสวมอุปกรณ์ป้องกัน เช่น หมวกคลุมศีรษะ หน้ากาก ถุงมือ รองเท้าบูท และชุดป้องกัน เพื่อลดและปิดกั้นอนุภาคที่นำเข้ามาโดยคนก่อนเข้าห้องปลอดเชื้อ สินค้าเข้าและออกจากห้องปลอดเชื้อผ่านทางช่องทางขนส่งสินค้า

(2) มีอะไรพิเศษเกี่ยวกับการออกแบบห้องคลีนรูมหรือไม่? วัสดุที่ใช้ในการสร้างห้องคลีนรูมควรไม่ก่อให้เกิดอนุภาคใดๆ ดังนั้นจึงนิยมใช้การเคลือบพื้นด้วยอีพ็อกซี่หรือโพลียูรีเทนโดยรวม แผงกั้นและแผงฝ้าเพดานทำจากสแตนเลสขัดเงาหรือเหล็กกล้าอ่อนเคลือบผง หลีกเลี่ยงมุมฉากโดยใช้พื้นผิวโค้ง รอยต่อทั้งหมดจากมุมถึงพื้นและจากมุมถึงฝ้าเพดานต้องปิดผนึกด้วยอีพ็อกซี่ซีลแลนท์เพื่อป้องกันการสะสมหรือการเกิดอนุภาคที่รอยต่อ อุปกรณ์ในห้องคลีนรูมได้รับการออกแบบมาเพื่อลดการปนเปื้อนในอากาศให้น้อยที่สุด ใช้เฉพาะไม้ถูพื้นและถังน้ำที่ทำขึ้นเป็นพิเศษเท่านั้น เฟอร์นิเจอร์ในห้องคลีนรูมก็ควรได้รับการออกแบบมาเพื่อลดอนุภาคให้น้อยที่สุดและทำความสะอาดง่ายด้วย

(3) วิธีการเลือกน้ำยาฆ่าเชื้อที่เหมาะสม? ขั้นแรก ควรทำการวิเคราะห์สภาพแวดล้อมเพื่อยืนยันชนิดของจุลินทรีย์ที่ปนเปื้อนผ่านการตรวจสอบสภาพแวดล้อม ขั้นตอนต่อไปคือการพิจารณาว่าน้ำยาฆ่าเชื้อชนิดใดสามารถฆ่าจุลินทรีย์จำนวนที่ทราบได้ ก่อนที่จะทำการทดสอบความเป็นพิษตามเวลาสัมผัส (วิธีเจือจางในหลอดทดลองหรือวิธีวัสดุพื้นผิว) หรือการทดสอบ AOAC จำเป็นต้องประเมินและยืนยันว่าน้ำยาฆ่าเชื้อที่มีอยู่เหมาะสมหรือไม่ ในการฆ่าจุลินทรีย์ในห้องปลอดเชื้อ โดยทั่วไปมีกลไกการหมุนเวียนน้ำยาฆ่าเชื้อสองประเภท: ① การหมุนเวียนน้ำยาฆ่าเชื้อหนึ่งชนิดและสารฆ่าสปอร์หนึ่งชนิด ② การหมุนเวียนน้ำยาฆ่าเชื้อสองชนิดและสารฆ่าสปอร์หนึ่งชนิด หลังจากกำหนดระบบการฆ่าเชื้อแล้ว สามารถทำการทดสอบประสิทธิภาพการฆ่าเชื้อแบคทีเรียเพื่อเป็นพื้นฐานในการเลือกน้ำยาฆ่าเชื้อ หลังจากเสร็จสิ้นการทดสอบประสิทธิภาพการฆ่าเชื้อแบคทีเรียแล้ว จำเป็นต้องมีการทดสอบภาคสนาม นี่เป็นวิธีการสำคัญในการพิสูจน์ว่า SOP การทำความสะอาดและการฆ่าเชื้อและการทดสอบประสิทธิภาพการฆ่าเชื้อแบคทีเรียของน้ำยาฆ่าเชื้อนั้นมีประสิทธิภาพหรือไม่ เมื่อเวลาผ่านไป จุลินทรีย์ที่ตรวจไม่พบมาก่อนอาจปรากฏขึ้น และกระบวนการผลิต บุคลากร ฯลฯ ก็อาจเปลี่ยนแปลงไป ดังนั้นจึงจำเป็นต้องทบทวนขั้นตอนการปฏิบัติงานมาตรฐาน (SOP) ด้านการทำความสะอาดและการฆ่าเชื้ออย่างสม่ำเสมอ เพื่อยืนยันว่ายังคงใช้ได้กับสภาพแวดล้อมปัจจุบันหรือไม่

(4) ทางเดินสะอาดหรือทางเดินสกปรก? ผงยา เช่น ยาเม็ดหรือแคปซูล จัดเป็นทางเดินสะอาด ในขณะที่ยาปลอดเชื้อ ยาน้ำ ฯลฯ จัดเป็นทางเดินสกปรก โดยทั่วไป ผลิตภัณฑ์ยาที่มีความชื้นต่ำ เช่น ยาเม็ดหรือแคปซูล จะแห้งและมีฝุ่น จึงมีความเสี่ยงต่อการปนเปื้อนข้ามสูงกว่า หากความแตกต่างของความดันระหว่างพื้นที่สะอาดและทางเดินเป็นบวก ผงยาจะหลุดออกจากห้องไปยังทางเดินและมีแนวโน้มที่จะถูกถ่ายโอนไปยังห้องสะอาดถัดไป โชคดีที่ยาแห้งส่วนใหญ่ไม่เอื้อต่อการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ ดังนั้นโดยทั่วไปแล้ว ยาเม็ดและผงยาจึงผลิตในโรงงานที่มีทางเดินสะอาด เนื่องจากจุลินทรีย์ที่ลอยอยู่ในทางเดินไม่สามารถหาสภาพแวดล้อมที่พวกมันสามารถเจริญเติบโตได้ ซึ่งหมายความว่าห้องนั้นมีความดันเป็นลบเมื่อเทียบกับทางเดิน สำหรับผลิตภัณฑ์ยาปลอดเชื้อ (ผ่านกระบวนการ) ยาปลอดเชื้อ หรือมีปริมาณจุลินทรีย์ต่ำ และยาน้ำ จุลินทรีย์มักจะพบแหล่งเพาะเลี้ยงที่เอื้อต่อการเจริญเติบโต หรือในกรณีของผลิตภัณฑ์ยาปลอดเชื้อที่ผ่านกระบวนการแล้ว จุลินทรีย์เพียงตัวเดียวก็อาจก่อให้เกิดความเสียหายร้ายแรงได้ ดังนั้น สถานที่เหล่านี้จึงมักถูกออกแบบให้มีทางเดินที่ไม่สะอาด เนื่องจากมีจุดประสงค์เพื่อป้องกันไม่ให้จุลินทรีย์ที่อาจก่อให้เกิดอันตรายเข้าไปในห้องปลอดเชื้อ