ขั้นตอนการกำหนดมาตรฐานห้องพักปลอดเชื้อและข้อกำหนดการยอมรับ

1. วัตถุประสงค์: ขั้นตอนนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อให้ขั้นตอนที่เป็นมาตรฐานสำหรับการดำเนินงานปลอดเชื้อและการป้องกันห้องพักปลอดเชื้อ

2. ขอบเขตของการใช้งาน: ห้องปฏิบัติการทดสอบทางชีวภาพ

3. ผู้รับผิดชอบ: ผู้ทดสอบหัวหน้างาน QC

4. นิยาม: ไม่มี

5. ข้อควรระวังด้านความปลอดภัย

ดำเนินการปลอดเชื้ออย่างเคร่งครัดเพื่อป้องกันการปนเปื้อนของจุลินทรีย์ ผู้ประกอบการควรปิดหลอด UV ก่อนเข้าห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อ

6. ขั้นตอน

6.1. ห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อควรติดตั้งห้องผ่าตัดที่ผ่านการฆ่าเชื้อและห้องบัฟเฟอร์ ความสะอาดของห้องผ่าตัดที่ผ่านการฆ่าเชื้อควรไปถึงระดับ 10,000 ควรรักษาอุณหภูมิในร่มไว้ที่ 20-24 ° C และควรรักษาความชื้นไว้ที่ 45-60% ความสะอาดของม้านั่งที่สะอาดควรไปถึงระดับ 100

6.2. ห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อควรได้รับการรักษาให้สะอาดและเป็นสิ่งต้องห้ามอย่างเคร่งครัดที่จะกองขยะเพื่อป้องกันการปนเปื้อน

6.3. ป้องกันการปนเปื้อนของอุปกรณ์การฆ่าเชื้อและสื่อวัฒนธรรมอย่างเคร่งครัด ผู้ที่ปนเปื้อนควรหยุดใช้

6.4. ห้องฆ่าเชื้อควรติดตั้งเครื่องฆ่าเชื้อสมาธิในการทำงานเช่นสารละลาย Cresol 5%, แอลกอฮอล์ 70%, สารละลาย chlormethionine 0.1% ฯลฯ ฯลฯ

6.5. ห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อควรได้รับการฆ่าเชื้อและทำความสะอาดอย่างสม่ำเสมอด้วยยาฆ่าเชื้อที่เหมาะสมเพื่อให้แน่ใจว่าความสะอาดของห้องพักปลอดเชื้อนั้นตรงตามข้อกำหนด

6.6. เครื่องมือทั้งหมดเครื่องมือจานและรายการอื่น ๆ ที่ต้องนำเข้าไปในห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อควรถูกห่อหุ้มอย่างแน่นหนาและผ่านการฆ่าเชื้อด้วยวิธีการที่เหมาะสม

6.7. ก่อนเข้าห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อพนักงานจะต้องล้างมือด้วยสบู่หรือยาฆ่าเชื้อแล้วเปลี่ยนเป็นเสื้อผ้าทำงานพิเศษรองเท้าหมวกหน้ากากและถุงมือในห้องบัฟเฟอร์ (หรือเช็ดมืออีกครั้งด้วยเอทานอล 70%) ก่อนเข้าห้องปลอดเชื้อ ดำเนินการในห้องแบคทีเรีย

6.8. ก่อนที่จะใช้ห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วหลอดอัลตราไวโอเลตในห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อจะต้องเปิดให้มีการฉายรังสีและการฆ่าเชื้อนานกว่า 30 นาทีและต้องเปิดม้านั่งที่สะอาดสำหรับการเป่าลมในเวลาเดียวกัน หลังจากการดำเนินการเสร็จสิ้นห้องพักปลอดเชื้อควรได้รับการทำความสะอาดในเวลาและจากนั้นผ่านการฆ่าเชื้อด้วยแสงอัลตราไวโอเลตเป็นเวลา 20 นาที

6.9. ก่อนการตรวจสอบควรเก็บบรรจุภัณฑ์ด้านนอกของตัวอย่างการทดสอบและต้องไม่เปิดเพื่อป้องกันการปนเปื้อน ก่อนการตรวจสอบให้ใช้ลูกบอลฝ้ายแอลกอฮอล์ 70% เพื่อฆ่าเชื้อพื้นผิวด้านนอก

6.10. ในระหว่างการดำเนินการแต่ละครั้งควรมีการควบคุมเชิงลบเพื่อตรวจสอบความน่าเชื่อถือของการดำเนินการปลอดเชื้อ

6.11. เมื่อดูดซับของเหลวแบคทีเรียคุณต้องใช้ลูกดูดเพื่อดูดซับ อย่าแตะที่ฟางโดยตรงด้วยปากของคุณ

6.12. เข็มฉีดยาจะต้องผ่านการฆ่าเชื้อด้วยเปลวไฟก่อนและหลังการใช้งานแต่ละครั้ง หลังจากระบายความร้อนวัฒนธรรมสามารถฉีดวัคซีนได้

6.13. ฟาง, หลอดทดสอบ, จาน Petri และอุปกรณ์อื่น ๆ ที่มีของเหลวแบคทีเรียควรแช่ในถังการทำหมันที่มีสารละลายไลต์ 5% สำหรับการฆ่าเชื้อโรคและนำออกและล้างหลังจาก 24 ชั่วโมง

6.14. หากมีของเหลวของแบคทีเรียที่หกอยู่บนโต๊ะหรือพื้นคุณควรเทสารละลายกรดคาร์โบลิก 5% ทันทีหรือ 3% ไลโซลในพื้นที่ที่ปนเปื้อนเป็นเวลาอย่างน้อย 30 นาทีก่อนที่จะรักษา เมื่อเสื้อผ้าและหมวกทำงานมีการปนเปื้อนด้วยของเหลวแบคทีเรียพวกเขาควรถูกถอดออกทันทีและล้างหลังจากการทำหมันไอน้ำแรงดันสูง

6.15. รายการทั้งหมดที่มีแบคทีเรียที่มีชีวิตจะต้องถูกฆ่าเชื้อก่อนที่จะถูกล้างภายใต้ก๊อก มันเป็นสิ่งต้องห้ามอย่างเคร่งครัดที่จะก่อให้เกิดมลพิษท่อระบายน้ำ

6.16. ควรตรวจสอบจำนวนอาณานิคมในห้องปลอดเชื้อทุกเดือน ด้วยการเปิดม้านั่งที่สะอาดใช้จานเพาะเชื้อหลายชนิดที่มีเส้นผ่านศูนย์กลางภายใน 90 มม. และฉีดยาอย่างปลอดเชื้อประมาณ 15 มล. ของสารอาหารวุ้นสารอาหารที่ได้รับการละลายและระบายความร้อนประมาณ 45 ° C หลังจากการแข็งตัวให้วางกลับหัวที่ 30 ถึง 35 ฟักเป็นเวลา 48 ชั่วโมงในตู้ฟักไข่℃ หลังจากพิสูจน์ความเป็นหมันให้ใช้แผ่น 3 ถึง 5 แผ่นและวางไว้ที่ด้านซ้ายกลางและขวาของตำแหน่งการทำงาน หลังจากเปิดฝาครอบและเปิดเผยพวกเขาเป็นเวลา 30 นาทีให้วางคว่ำลงในศูนย์บ่มเพาะ 30 ถึง 35 ° C เป็นเวลา 48 ชั่วโมงและนำออกมา พิจารณา. จำนวนเฉลี่ยของแบคทีเรียเบ็ดเตล็ดบนจานในพื้นที่สะอาดคลาส 100 จะต้องไม่เกิน 1 อาณานิคมและจำนวนเฉลี่ยในห้องสะอาดระดับ 10,000 จะต้องไม่เกิน 3 อาณานิคม หากเกินขีด จำกัด ห้องพักที่ผ่านการฆ่าเชื้อควรถูกฆ่าเชื้ออย่างทั่วถึงจนกว่าการตรวจสอบซ้ำจะตอบสนองความต้องการ

7. อ้างถึงบท (วิธีการตรวจสอบการฆ่าเชื้อ) ใน "วิธีการตรวจสอบด้านสุขอนามัยยา" และ "การปฏิบัติในการดำเนินงานมาตรฐานของจีนสำหรับการตรวจสอบยา"

8. แผนกจัดจำหน่าย: แผนกจัดการคุณภาพ

คำแนะนำทางเทคนิคของห้องพักทำความสะอาด:

หลังจากได้รับสภาพแวดล้อมที่ผ่านการฆ่าเชื้อและวัสดุที่ผ่านการฆ่าเชื้อแล้วเราต้องรักษาสถานะที่ผ่านการฆ่าเชื้อเพื่อศึกษาจุลินทรีย์เฉพาะที่รู้จักหรือใช้ประโยชน์จากการทำงานของพวกเขา มิฉะนั้นจุลินทรีย์ต่าง ๆ จากภายนอกสามารถผสมได้อย่างง่ายดายปรากฏการณ์ของการผสมจุลินทรีย์ที่ไม่เกี่ยวข้องจากภายนอกเรียกว่าแบคทีเรียที่ปนเปื้อนในจุลชีววิทยา การป้องกันการปนเปื้อนเป็นเทคนิคที่สำคัญในงานทางจุลชีววิทยา การฆ่าเชื้ออย่างสมบูรณ์ในมือข้างหนึ่งและการป้องกันการปนเปื้อนในอีกด้านหนึ่งเป็นสองด้านของเทคนิคปลอดเชื้อ นอกจากนี้เราต้องป้องกันจุลินทรีย์ภายใต้การศึกษาโดยเฉพาะอย่างยิ่งจุลินทรีย์ที่ทำให้เกิดโรคหรือจุลินทรีย์ที่ได้รับการดัดแปลงพันธุกรรมซึ่งไม่มีอยู่ในธรรมชาติจากการหลบหนีจากภาชนะทดลองของเราไปสู่สภาพแวดล้อมภายนอก สำหรับวัตถุประสงค์เหล่านี้ในจุลชีววิทยามีหลายมาตรการ

ห้องฆ่าเชื้อมักจะเป็นห้องเล็ก ๆ ที่ตั้งขึ้นเป็นพิเศษในห้องปฏิบัติการจุลชีววิทยา สามารถสร้างด้วยแผ่นและแก้ว พื้นที่ไม่ควรมีขนาดใหญ่เกินไปประมาณ 4-5 ตารางเมตรและความสูงควรอยู่ที่ประมาณ 2.5 เมตร ควรตั้งห้องบัฟเฟอร์นอกห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อ ประตูห้องบัฟเฟอร์และประตูห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อไม่ควรเผชิญกับทิศทางเดียวกันเพื่อป้องกันไม่ให้การไหลเวียนของอากาศนำมาซึ่งแบคทีเรียเบ็ดเตล็ด ทั้งห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อและห้องบัฟเฟอร์จะต้องมีอากาศ อุปกรณ์ระบายอากาศในร่มจะต้องมีอุปกรณ์กรองอากาศ พื้นและผนังของห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อจะต้องราบรื่นยากที่จะปิดกั้นสิ่งสกปรกและทำความสะอาดง่าย พื้นผิวการทำงานควรอยู่ในระดับ ทั้งห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อและห้องบัฟเฟอร์มีไฟอุลตร้าไวโอเลต ไฟอัลตราไวโอเลตในห้องปลอดเชื้ออยู่ห่างจากพื้นผิวทำงาน 1 เมตร พนักงานเข้าห้องที่ผ่านการฆ่าเชื้อควรสวมใส่เสื้อผ้าและหมวกที่ผ่านการฆ่าเชื้อ

ปัจจุบันห้องพักปลอดเชื้อส่วนใหญ่มีอยู่ในโรงงานจุลชีววิทยาในขณะที่ห้องปฏิบัติการทั่วไปใช้ม้านั่งที่สะอาด ฟังก์ชั่นหลักของม้านั่งที่สะอาดคือการใช้อุปกรณ์การไหลของอากาศแบบลามินาร์เพื่อกำจัดฝุ่นขนาดเล็กต่าง ๆ รวมถึงจุลินทรีย์บนพื้นผิวการทำงาน อุปกรณ์ไฟฟ้าช่วยให้อากาศผ่านตัวกรอง HEPA จากนั้นเข้าสู่พื้นผิวการทำงานเพื่อให้พื้นผิวการทำงานอยู่ภายใต้การควบคุมของอากาศที่ผ่านการฆ่าเชื้อ นอกจากนี้ยังมีม่านอากาศความเร็วสูงที่ด้านข้างใกล้กับด้านนอกเพื่อป้องกันไม่ให้อากาศของแบคทีเรียภายนอกเข้ามา

ในสถานที่ที่มีสภาพที่ยากลำบากสามารถใช้กล่องที่ผ่านการฆ่าเชื้อได้แทนม้านั่งที่สะอาด กล่องที่ผ่านการฆ่าเชื้อมีโครงสร้างที่เรียบง่ายและง่ายต่อการเคลื่อนย้าย มีสองรูที่ด้านหน้าของกล่องซึ่งถูกบล็อกโดยประตูแบบพุชดึงเมื่อไม่ทำงาน คุณสามารถยืดแขนของคุณในระหว่างการใช้งาน ส่วนบนของด้านหน้าติดตั้งกระจกเพื่ออำนวยความสะดวกในการทำงานภายใน มีหลอดอัลตราไวโอเลตภายในกล่องและเครื่องใช้และแบคทีเรียสามารถใส่เข้าไปในประตูเล็ก ๆ ที่ด้านข้าง

เทคนิคการใช้งานแบบปลอดเชื้อในปัจจุบันไม่เพียง แต่มีบทบาทสำคัญในการวิจัยทางจุลชีววิทยาและการใช้งานเท่านั้น แต่ยังใช้กันอย่างแพร่หลายในเทคโนโลยีชีวภาพหลายอย่าง ตัวอย่างเช่นเทคโนโลยีดัดแปรพันธุกรรมเทคโนโลยีโมโนโคลนอลแอนติบอดี ฯลฯ